云南荧光定量PCR技术应用范围

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实时荧光定量PCR是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。

实时荧光定量PCR是实验室较常用的实验，是一次由定性技术向定量技术的飞跃，运用该项技术，可以对DNA、RNA样品进行相对定量、绝对定量和定性分析。实时荧光定量PCR技术以其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点，提高了普通PCR技术的特异性和准确性，成为了分子生物学研究中的重要工具。

实时荧光定量PCR技术应用范围：

１）目的基因相对表达差异分析（2-△△CT）；

２）miPNA检测；

３）基因型分析；

４）转基因生物（GMO检测）；

５）细胞治疗药物组织分布检测；

实时荧光定量PCR技术优势：

１）灵敏度高，可以检测低拷贝的目的基因；

２）高精度，PCR扩增阶段包括3个阶段：指数增长期、线性增长期和平台期、96个重复指数增长期表现出高精度，而平台期则变化差异较大；

３）定量能力强，简单的流程就能得到高质量的定量数据；

４）动力学范围宽，可以精确定量9个数量级的差异；

５）速度快，节省时间和劳力，不需要电泳检测；

６）安全，使用荧光染料发光，不用EB或放射性物质，极大降低对实验人员健康的威胁。

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